Wskazówki dotyczące używania enzymów

‌Tips do używania enzymów ‌ głównie zawierają następujące aspekty:

‌ Warunki reakcji Kontrol ‌: Na aktywność enzymów wpływają czynniki takie jak temperatura, wartość pH i stężenie jonowe {{0}} Na przykład optymalne warunki reakcji dla enzymu TG to pH 7.0-8.0} i temperatura 37 stopnia ‌ . dla uniwersalnej nukleasu, optymalne to 8.}}}}} temperatury 37 stopni ‌ . dla uniwersalnego nuklease, optymalne.} 0, wysoko. Temperatura aktywności wynosi 37 stopni, a zakres temperatury aktywności enzymu wynosi 0 ~ 42 stopnie ‌.

‌Dermine Dosage‌: Wybierz odpowiednią dawkę enzymu zgodnie z celem eksperymentu i pożądanego efektu . Zaleca się przeprowadzenie najpierw eksperymentu na małą skalę, obserwuj efekt, a następnie dostosować dawkę w razie potrzeby . na przykład, dla eukariotycznego lizatu komórkowego, dodanie 1ul lub 500 do nuklearowania, do każdej 106 .. komórki .

‌Prepare Rozwiązanie ‌: Rozpuścić enzym w odpowiednim buforze, takim jak Tris-HCl, PBS itp. . Zaleca się użycie sterylnego środowiska operacyjnego, aby uniknąć zanieczyszczenia mikrobiologicznego . Stężenie i objętość rozwiązania powinny być dostosowywane według potrzeb eksperymentalnych .}

‌ Warunki storage‌: Enzymy powinny być przechowywane w odpowiednich warunkach temperatury i wilgotności oraz unikać narażenia na nieodpowiednie środowiska, takich jak wysoka temperatura, wilgotność i światło {{0}, na przykład, półka na otwarcie opakowania na uniwersalnej nukleazie wynosi 1 rok w 2-8 stopień .. Zanieczyszczenie . ‌
‌ Common Problemy z radzeniem sobie z ‌: Możesz napotkać niektóre problemy podczas użytkowania, takie jak hamowanie aktywności enzymatycznej i przedłużony czas reakcji . Na przykład wspólne odczynniki, takie jak EDTA i hydrochlorki guanidyny, mają hamujący działanie na aktywność nukie uniwersalnych, a efekty te mogą być kompensowane przez kontrolę stawienia i zwiększenie zwiększania ENZYME. Stężenie . ‌
‌ Metody anaktywacji i usuwania ‌: W przypadku nukleaz, które muszą być inaktywowane, można użyć ekstremalnych warunków, takich jak 100 mm NaOH i 70 stopni przez 30 minut . nukleaz można usunąć metodą chromatografii wymiany anionowej, filtracji żelowej i innych metod .}